【課程大綱】金華2025版《中國藥典》醫療器械無菌微生物檢驗員
Ⅱ 、Ⅲ類醫療器械企業無菌檢 (化) 驗人員，醫用口罩檢驗人員；體 外診斷試劑企業微生物檢驗員，潔凈環境檢測人員等。根據《醫療器 械生產企業許可證現場審查標準》和《醫療器械生產企業監督檢查計 劃》，每個企業應有 2 名以上專職檢驗人員。
常用無菌醫療器械性能要求
整形材料
v 有良好的生物相容性；
v 有一定的柔軟性并保持一定強度；
v 容易加工成所要求的復雜形狀；耐水、耐汗、 耐唾液、耐溶劑，并有一定的耐熱和耐寒性；
v 易染色；
v 質輕并易于清洗。一次性使用輸液、輸血、注射器具
v 材料要求及標準
GB15593 《 輸血（液）器具用軟聚氯乙烯塑料 》
YY0242 《 醫用輸液、輸血、注射器用聚丙烯專用 料 》
YY114 《 醫用輸液、輸血、注射器用聚乙烯專用料 》
v 產品技術要求及標準
此類產品 基本由醫 用PVC 、 PP 、PE 等材料制 成，符合 標準的、 好的原料 是此類產
品質量的 基本保證
一、無菌檢驗員培訓目的
1. 醫療器械口罩防護用品行業標準微生物檢驗方法；
2. 產品的無菌檢驗方法、培養基適用性檢查及產品方法適用性試驗；
3. 初始污染菌檢驗方法、計數培養基適用性檢查及產品修正系數；
4. 純化水微生物限度檢驗及所有培養基適用性檢查；
5. 潔凈間監測方法及問題解析；
6. 不同供試品的制備方法；
7. 實驗所有菌種保藏、管理、傳代和使用技術；
供試品的制備
創可貼供試品：將包裝好的創可貼打開，用剪刀將創可貼剪碎，放入100ml pH7.0氯化鈉—蛋白胨緩沖液中浸泡1小時，取水層作為供試品。
7.3. 試驗菌液的制備
7.3.1. 接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物至營養瓊脂培養基斜面中,置30－35℃培養18-24小時，分別取用3-5ml 0.9％的無菌氯化鈉溶液，反復吹洗，沖下菌苔，震蕩80次，用10倍遞增稀釋制成每1ml含菌數小于100 CFU的菌懸液。
7.3.2. 接種生孢梭菌的新鮮培養物至12ml硫乙醇酸鹽流體培養基中,30～35℃培養18～24小時，取上述培養物1ml加9ml0.9%無菌氯化鈉溶液10倍遞增稀釋制成每1ml含菌數小于100 CFU的菌懸液。
7.3.3. 接種白色念珠菌的新鮮培養物至10ml改良馬丁培養基中，置23－28℃培養24-48小時，取上述培養物1ml加9ml 0.9％的無菌氯化鈉溶液10倍遞增稀釋制成每1ml含菌數小于100CFU的
菌懸液。
7.3.4. 接種黑曲霉的新鮮培養物至改良馬丁瓊脂斜面培養基中,置23-28℃培養5-7天，使大量孢子形成。用3-5ml0.9％的無菌氯化鈉溶液將孢子洗脫并過濾孢子懸液至無菌試管內作為原液，取1m原液加9ml 0.9％的無菌氯化鈉溶液10倍遞增逐級稀釋制成每1ml含孢子數小于100CFU的孢子懸液。
7.4.培養基靈敏度檢查
取每管裝量為12ml的硫乙醇酸鹽流體培養基9支，分別接種小于100 CFU的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌菌懸液各1ml，每種培養基各接種2支，另1支不接種作為空白對照，培養3天；取每管裝量為9ml的改良馬丁培養基5支，分別接種小于100 CFU的白色念珠菌、黑曲霉菌懸液各1ml，每種培養基各接種2支，另1支不接種作為空白對照，培養5天，逐日觀察結果�？瞻讓φ展軣o菌生長,加菌的培養基管均生長良好,判靈敏度檢查合格。
硫乙醇酸鹽流體培養基：
擬驗證的創可貼無菌檢查試驗方法
分別取創可貼供試品，加入相應的硫乙醇酸鹽流體培養基與改良馬丁培養基各100ml，細菌于30～35℃培養14天，真菌于23～28℃培養14天。同時每天觀察并記錄實驗結果。
7.6.驗證試驗的方法
7.6.1.將創可貼供試品分別人工污染小于100cfu的金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、銅綠假單胞菌、生孢梭菌、黑曲霉、白色念株菌菌懸液后加入相應的硫乙醇酸鹽流體培養基與改良馬丁培養基各100ml，作為供試品陽性對照組；另分別取裝有同體積培養基的容器，加入等量試驗菌，作為陽性對照組；同時平行做緩沖液的陰性對照組。
7.6.2.細菌于30～35℃培養5天，真菌于23～28℃培養5天。每天觀察并記錄實驗結果。
7.7.可接受標準
陰性對照呈陰性，陽性對照呈陽性，供試品陽性對照組微生物生長情況與陽性對照組一致，說明創可貼按照《無菌檢查法標準操作規程》操作，供試品對微生物生長無不良影響，則創可貼的無菌檢查方法通過。
二、無菌檢驗員培訓內容
1 、微生物基礎知識
1) 檢測實驗用培養基配制、滅菌；培養基、器具滅菌等相關問題詳講；
2) 查看大腸、銅綠、金葡各種培養基生長情況，三種菌劃平板
3) 供試液制備、細菌菌落、初始污染菌檢測；
4) 生產人員手、臺面、工作服菌落計數實驗操作；
5) 大腸桿菌檢測、綠膿桿菌及金黃色葡萄球菌檢測方法、操作步驟；
（一）對疾病的預防、診斷、治療、監護、緩解；
v （二）對損傷或者殘疾的診斷、治療、監護、緩解、
補償；
v （三）對解剖或者生理過程的研究、替代、調節；
v （四）妊娠控制。
定義要點：
v 使用方式
可以單獨，也可以組合
硬件、軟件、流程性材料
隱形眼鏡
可吸收縫合線
醫用橡膠
CT 機
v 種類：
用于人體
v 作用機理：
不同于藥品、生物制品
醫療器械與藥品、生物制品的區別：
v 對人體體表及體內的作用是否用藥 理學、免疫學或者代謝的手段
三、無菌檢驗員培訓價格
初級1400元，中級1600元，高級1800元。
四、無菌檢驗員聯系老師
企證技術 李老師：131 6081 2615 （V同）
無菌醫療器械實施細則
（一）主要內容（1+x ）
v 通用要求 （1 ）
適應于所有醫療器械, 包括無菌醫療器械
v 專用要求 （x ）
僅適應于無菌醫療器械
v 生產環境（潔凈區及其控制）
v 工藝用水和工藝用氣
v 潔凈區內設備和設施
v 滅菌及其確認或無菌加工
v 其他要求： 初包裝、動物源性材料、菌檢、
留樣等
貫串無菌醫療器械專用要求的
一條主線就是
最大程度地控制和降低污染
（主要是微粒污染和微生物污染）
（二）無菌醫療器械實施細則
文本結構
v 第一章 總則
v 第二章 管理職責
v 第三章 資源管理
人力資源、基礎設施
生產環境 ( 潔凈區 ) 要求
工藝用水和工藝用氣要求
v 第四章 文件與記錄
v 第五章 設計和開發
v 第六章 采購
v 動物源材料、初包裝要求
v 第七章 生產管理
產品實現的過程控制
潔凈區內設備設施要求
滅菌過程要求
無菌加工
v 第八章 監視和測量
v 菌檢 、 留樣
v 第九章 銷售和服務
v 第十章 不合格品控制
v 第十一章 顧客投訴和不良事 件監測
v 第十二章 分析和改進
v 第十三章 附則
術語、適應范圍、執行相關法規和標準、不涉及條款
3 、無菌基礎知識
1) 無菌檢查兩種實驗方法：直接接種法、薄膜過濾法
2) 純化水微生物限度檢測實驗
3) 查看斜面實驗結果；
4) 實驗總結；修正系數講解；培養基靈敏度；產品方法適用性實驗；
5) 菌種傳代與保存；
6) 微粒污染；潔凈環境監測。
醫療器械驗收管理制度
首先，醫療器械驗收工作應在與其儲存條件相符的待驗區或合適的區域進行，驗收人員應根據原始憑證，對購進的每一個醫療器械品種進行逐批、逐次的驗收。進行驗收時應核對醫療器械的生產廠商、供貨單位、品名、劑型、規格、包裝規格、數量、批準文號、生產日期、生產批號、有效期等是否與單據相符；醫療器械外觀性狀的色澤、是否發霉異物、包裝有無破損等，醫療器械包裝標識、標簽、說明書是否符合要求；醫療器械外包裝上必須標明產品注冊證書編號，每批醫療器械應當有加蓋企業印章的檢驗合格證和產品注冊證書及注冊證書登記表的復印件
其次，驗收人員在驗收醫療器械時應做好驗收記錄，并簽字保存備查。驗收記錄應記載供貨單位、生產廠商、數量、到貨日期、產品名稱、規格、產品注冊證號、生產批號、有效期、質量狀況、驗收結論和驗收人員簽名等項內容。 驗收記錄應保存至超過醫療器械有效期2年。驗收工作中發現質量有疑問或資料不全、手續不清的醫療器械，應予以拒收，并按規定進行處理。 驗收合格可入庫的醫療器械，驗收人員應與倉庫保管員辦理交接手續；由保管員根據驗收結論和驗收員的簽章將醫療器械放置于相應的庫區，并做好記錄
菌液制備 接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物至營養肉湯培養基中或營養瓊脂培養基；接種生孢梭菌的新鮮培養物至硫乙醇酸鹽流體培養基中，30℃～35℃培養 18小時～24小時；接種白色念珠菌的新鮮培養物至改良馬丁培養基中或改良馬丁瓊脂培養基上，23～28℃培養 24～48小時。上述培養物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數小于100 cfu （菌落形成單位）的菌懸液。 接種黑曲霉的新鮮培養物至改良馬丁瓊脂斜面培養基上，23～28℃培養 5～7天，加入3～5ml含 0.05％（v/v）聚山梨酯 80的 0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管內，用含0.05％（v/v）聚山梨酯 80的 0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數小于100 cfu的孢子懸液。
菌懸液在室溫下放置應在 2小時內使用，若保存在2～8℃可在 24小時內使用。黑曲霉孢子懸液可保存在 2～8℃，在驗證過的貯存期內使用。 培養基接種 取每管裝量為 12ml的硫乙醇酸鹽流體培養基 9支，分別接種小于100 cfu的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各 2支，另 1支不接種作為空白對照，培養3天；取每管裝量為9ml的改良馬丁培養基5支,分別接種小于 100 cfu的白色念珠菌、黑曲霉各 2支，另 1支不接種作為空白對照，培養5天。逐日觀察結果。 結果判定 空白對照管應無菌生長，若加菌的培養基管均生長良好，判該培養基的靈敏度檢查符合規定。
2025版《中國藥典》醫療器械無菌微生物檢驗員
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【講師介紹】1. 醫療器械口罩防護用品行業標準微生物檢驗方法；
2. 產品的無菌檢驗方法、培養基適用性檢查及產品方法適用性試驗；
3. 初始污染菌檢驗方法、計數培養基適用性檢查及產品修正系數；
4. 純化水微生物限度檢驗及所有培養基適用性檢查；
5. 潔凈間監測方法及問題解析；
6. 不同供試品的制備方法；
7. 實驗所有菌種保藏、管理、傳代和使用技術；
企證技術 李老師：131 6081 2615 （V同）
【培訓對象】Ⅱ 、Ⅲ類醫療器械企業無菌檢 (化) 驗人員，醫用口罩檢驗人員；體 外診斷試劑企業微生物檢驗員，潔凈環境檢測人員等。根據《醫療器 械生產企業許可證現場審查標準》和《醫療器械生產企業監督檢查計 劃》，每個企業應有 2 名以上專職檢驗人員。
企證技術 李老師：131 6081 2615 （V同）
更新時間：2026/5/30 9:22:22
