【課程大綱】長治2020版中國藥典醫療器械無菌微生物檢驗員培訓公告
什么是微生物檢驗員？
微生物檢驗員怎么獲取？企業怎么獲取微生物檢驗員證書？
化驗室常用檢測設備：阿貝折光儀
使用方法 儀器安裝：安放在光亮處，應避免陽光的直接照射，以免液體試樣受熱迅速蒸發，檢查棱鏡上溫度計讀數是否符合要求（一般選用20±0.1℃或25±0.1℃）； 加樣：旋開測量棱鏡和輔助棱鏡的閉合旋鈕，使輔助棱鏡的磨砂斜面處于水平位置，若棱鏡表面不清潔，可滴加少量丙酮，用擦鏡紙順單一方向輕擦鏡面。待鏡面干凈后用滴管滴加數滴試樣于輔助棱鏡的毛鏡面上，迅速合上輔助棱鏡； 調光：轉動鏡筒使之垂直，調節反射鏡使射光進入棱鏡，同時調節目鏡的焦距，使目鏡中十字線清晰明亮，調節消色散補償器使目鏡中彩色光帶消失，再調節讀數螺旋，使明暗的界面恰好同十字線交叉處重合； 讀數：常用的阿貝折光儀可讀至小數點后的第四位，為了使讀數準確，一般應將試樣重復測量三次，每次相差不能超過0.0002，然后取平均值。
注意事項 注意保護棱鏡，清洗時只能用擦鏡紙而不能用濾紙等，加樣時不能將滴管口觸及鏡面，對于酸堿等腐蝕性液體不能使用阿貝折光儀； 每次測定時，試樣不恩能夠加的太多，一般只需加2-3滴即可； 注意保持儀器的清潔，保護刻度盤，每次試驗完畢，要在鏡面上加幾滴丙酮，并用擦鏡紙擦干； 讀數時，有時在目鏡中觀察不到清晰的明暗分界線，而是畸形的，這是由于棱鏡間未充滿液體；若出現弧形光環，則可能是由于光線未經過棱鏡而直接照射到聚光鏡上； 若待測試樣折射率不再1.3-1.7范圍內，不能夠用阿貝折光儀測定，也看不到明暗分界線。
一、微生物檢驗員證書頒發：
由權威部門頒發
二、微生物檢驗員證書培訓費用：
培訓費用
初級1 5 8 0元，中級1 7 8 0元，高級19 8 0元，中國計量測試學會授權機構質頒發，費用包含：培訓費、資料費、證書費、快遞費、發票。報名老師：梁老師1 5 9 2 1 0 9 7 6 5 8 （V信同號）
3.半固體或粘性液體食品 : 融化（45℃水浴），小于15min，取樣。
固體樣品的處理 :搗碎均質法 ：將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g放入帶225mL稀釋液的無菌均質杯中，8000~10000r/min均質1~2min即可。
剪碎振搖法 ：將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣進一步剪碎，放入帶225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。
研磨法：將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣放入無菌缽中充分研磨后，再放入帶有225mL無菌稀釋液的稀釋瓶中，蓋緊蓋后充分搖勻。
整粒振搖法：有完整自然保護膜的穎粒狀樣品(如蒜瓣、青豆等)，直接稱取25g整粒樣品置于帶有225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。
胃蠕動均質法：這是國外使用的一種新型的均質樣品的方法，將一定量的樣品和稀釋液放入無菌均質袋中，開機均質。均質器有一個長方形金屬盒，其旁安有金屬葉板，可打擊塑樹袋，金屬板由恒速馬達帶動，作前后移動而撞碎樣品。
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三、微生物檢驗員證書培訓內容
1.檢驗的化學基礎;
2.實驗室安全知識;
3.實驗室常用儀器講解;
4.檢驗技術及微生物檢驗技術，大腸桿菌，菌落總數，無菌、藥典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志賀氏菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌等菌種的實操視頻。
四、微生物檢驗員證書培訓相關
奶油 無菌操作打開包裝，取適量檢樣于滅菌三角燒瓶內，450C水浴或溫箱中加溫溶解，用滅菌吸管取25mL奶油放入含225ml滅菌生理鹽水或滅菌奶油稀釋液的燒瓶（瓶裝稀釋液應預置于450C水浴中保溫，10倍遞增稀釋時所用稀釋液亦同），振搖均勻，從檢樣融化到接種完畢時間不應超過30min。 注：奶油稀釋液：格林氏液（配法：氯化鈉9g、氯化鉀0.12g、氯化鈣0.24g、碳酸氫鈉0.2g、蒸餾水1000ml）250mL、蒸餾水750ml、瓊脂1g、加熱溶解，分裝每瓶225ml，1210C滅菌15min。
奶粉 罐裝奶粉的開罐取樣法同煉乳，袋裝奶粉應用蘸有75%酒精的棉球涂擦消毒袋口，以無菌操作開封取樣，稱取檢樣25g，放入裝有適量玻璃珠的滅菌三角燒瓶內，將225ml溫熱的滅菌生理鹽水徐徐加入（先用少量生理鹽水將奶粉調成糊狀，再全部加入，以免奶粉結塊），振搖使充分溶解和混勻。
奶酪 先用滅菌刀削去部分表面封蠟，用點燃的酒精棉球消毒表面，然后用滅菌刀切開奶酪，以無菌操作切取表層和深層檢樣各少許，置于滅菌乳缽內切碎，加入少量生理鹽水研成糊狀
五、微生物檢驗員證書相關
樣品的保存:樣品到實驗室后應在36h內檢驗（貝類是6h）。 進行必要和清晰的標識：樣品名稱、樣品描述、樣品批號、企業名稱和地址、取樣人、時間、地點、溫度和測試目的。 樣品在保存過程中采用適當的方法，取保樣品和微生物的狀態，仍能代表取樣時的特性。（特別需要注意溫度、pH值、氧氣等條件變化） 對樣品的貯存過程應有記錄。
樣品的處理方法 :是指對采取的樣品的分取、粉碎及混勻等過程，以保證樣品的均勻性，在檢驗時能具有代表性。 液體樣品 固體樣品 冷凍樣品
液體樣品的處理:1.瓶裝液體樣品的處理 2.盒裝或軟塑料包裝樣品的處理 3.半固體或粘性液體食品
瓶裝液體樣品的處理 :先搖勻-表面消毒-用無菌工具開罐-吸樣（>2.5cm深度） 用點燃的酒精棉球灼燒瓶口滅菌，接著用石炭酸或來蘇爾消毒后的紗布蓋好，再用滅菌開瓶器將蓋啟開； 含有二氧化碳的樣品可倒入500mL磨口瓶內，口勿蓋緊，覆蓋一滅菌紗布，輕輕搖蕩，待氣體全部逸出后，取樣25mL檢驗； 酸性飲料：pH<4.5 用滅菌的10%Na2CO3調至中性。
2.盒裝或軟塑料包裝樣品的處理: 將其開口處用75%酒精棉擦拭消毒，用滅菌剪子剪開包裝，覆蓋上滅菌紗布或浸有消毒液的紗布在剪開部分，直接吸取樣品25mL ，或傾入另一滅菌容器中再取樣25mL檢驗。
1、瓶裝液體樣品的處理 :用點燃的酒精棉球灼燒瓶口滅菌，接著用石炭酸或來蘇爾消毒后的紗布蓋好，再用滅菌開瓶器將蓋啟開； 含有二氧化碳的樣品可倒入500mL磨口瓶內，口勿蓋緊，覆蓋一滅菌紗布，輕輕搖蕩，待氣體全部逸出后，取樣25mL檢驗。
2、盒裝或軟塑料包裝樣品的處理 :將其開口處用75%酒精棉擦拭消毒，用滅菌剪子剪開包裝，覆蓋上滅菌紗布或浸有消毒液的紗布在剪開部分，直接吸取樣品25mL ，或傾入另一滅菌容器中再取樣25mL檢驗。
固體樣品的處理：1、搗碎均質法 ;將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g放入帶225mL稀釋液的無菌均質杯中，8000~10000r/min均質1~2min即可。
剪碎振搖法:將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣進一步剪碎，放入帶225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。
研磨法 :將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣放入無菌乳缽中充分研磨后，再放入帶有225mL無菌稀釋液的稀釋瓶中，蓋緊蓋后充分搖勻。
整粒振搖法 :直接稱取25g整粒樣品置于帶有225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。
采樣的要求 ：1、嚴格遵守樣品采集的操作規程。
2、所采樣品必須具有代表性。
3、采樣操作要防止污染，防止變質、損壞、丟失。
4、不得加入防腐劑、固定劑等。
5、樣品采集和現場測定必須有二人以上參加 。
食品微生物檢驗的采樣方法
國際食品微生物規格委員會（ICMSF）取樣方案；
美國食品和藥物管理局（FDA）的取樣方案；
世界糧農組織（FAO）取樣方案；
我國的食品取樣方案。
原則： 能采取完整包裝的樣品就不拆開取樣，必須拆開包裝取樣的應按無菌操作進行取樣.
)液體樣品采樣方法
生產工序監測采樣：車間空氣采樣：將5個直徑90mm的普通瓊脂平板分別置于車間的四角和中部，打開平皿蓋5min，然后蓋蓋送檢。
食物中毒微生物檢驗的取樣
可疑中毒源食品餐具
病人的嘔吐物
糞便或血液
糞便或血液
人畜共患病原微生物檢驗的取樣
當懷疑某一動物產品可能帶來人畜共患病病原體時，應結合畜禽傳染病學的基礎知識，采取病原體最集中、最易檢出的組織或體液送檢驗室檢驗。
在高壓蒸汽滅菌前要確保高壓鍋中的所有冷空氣已經排空，否則表上的蒸汽壓與蒸汽溫度之間不具對應關系，這樣會大大降低滅菌效果。
定期對滅菌效果進行監測和驗證，可采用：
物理監測法（留點溫度計法、熱電偶法）；
化學指示劑法（化學指示膠帶、指示卡等）；
生物指示法（孢子懸液、孢子條帶等）監控高壓滅菌
的效果。
添加成分的制備
制備含有有毒物質的添加成分（尤其是抗生素）時，需要特別小心（必要時在通風櫥內操作），避免因粉末的擴散造成實驗人員過敏或發生其他不良反應。
制備溶液時要特別小心并按產品使用說明操作，不要使用過期的試劑。
對于抗生素工作溶液，應當現用現配。在特定環境下，抗生素溶液應適量分裝后冷凍儲存，但解凍后的溶液不能再次冷凍，生產廠商應提供冷凍對抗生素活性影響的有關資料，也可由使用者自行測定。
微生物檢驗員證書
【講師介紹】長治2020版中國藥典醫療器械無菌微生物檢驗員培訓公告
微生物檢驗員
食品化學微生物實驗室
醫療器械行業申請GMP
化妝品行業
【培訓對象】長治2020版中國藥典醫療器械無菌微生物檢驗員培訓公告
企業主管食品質量、安全標準及監督管理工作崗位的人員、食品生產企業、經銷單位、質量監督部門、衛生檢驗部門及有關科研、管理部門的管理人員、技術人員和檢驗人員。
更新時間：2026/4/29 15:45:46
